本试剂盒仅限于科学研究使用,严禁用于医学诊断。以人白介素17(IL-17)检测为目的的ELISA试剂盒操作说明如下:
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行分析。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过适当温育并进行彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色反应。TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸性条件下转变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免在操作过程中造成任何细胞刺激。采集血液后,进行3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,进行3000转离心30分钟,获取上清液。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与生理盐水均匀混合并捣碎,随后进行3000转离心10分钟以获取上清液。
5. 保存:若样品未能及时检测,请按一次用量分装并存放于-20℃,避免反复冻融。在室温下解冻,并确保样品均匀充分解冻。
操作注意事项
所需物品与试剂盒组成如下:
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:将蒸馏水按1:20的比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。一旦准备完成,按捺洗板方法进行操作。
结果判断
为绘制标准曲线,请在Excel表格中,将标准品浓度作为横坐标,相应的OD值作为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明:本试剂盒的性能受到严格监管,使用前请仔细阅读操作说明,以确保结果的准确性。本试剂盒由环亚集团提供,致力于生物医疗领域的研发和创新。